斑马鱼肠粘膜细胞悬浮液的操作有助于了解肠炎

在水产养殖中，饲料引起的肠粘膜慢性炎症尤为常见，而肠粘膜免疫屏障往往是病、细菌等水产病原体首先侵入的场所。因此，近来鱼类肠炎的研究成为水产基础病害研究的热点。

中国科学院水生生物研究所(IHB)的研究人员此前已经开发了一套完整的使用斑马鱼的肠炎研究系统，包括肠道粘膜免疫细胞成像和豆粕诱导肠炎的多组学分析( SBMIE)。斑马鱼食源性肠炎模型已用于一系列水产药物开发项目。然而，细胞水平的肠粘膜免疫研究需要方法学上的突破，才能进行相关的深入分析。

近期，我院夏晓琴教授课题组创新了斑马鱼肠粘膜免疫细胞悬液的制备方法，并开发了一种快速简便的操作方法。该研究发表在免疫学前沿。

研究人员通过反复移液将斑马鱼肠道绒毛肌层上方的免疫细胞分离出来。与养殖鱼类常用的网状摩擦法相比，轻轻吹打的吹法对斑马鱼粘膜组织细胞的活力损失较小。

利用流式细胞术结合荧光标记免疫细胞的门控策略，研究人员可以准确分离斑马鱼肠道粘膜免疫细胞群中的各种免疫细胞群，包括中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞。用免疫细胞荧光标记的斑马鱼品系用于分离。发现流式细胞仪检测的细胞活力大大提高，细胞基本无粘连，荧光表达和细胞形态更好。

转录组学结果显示，免疫细胞标记基因在分离细胞组中的表达明显高于肠组织本身，粘蛋白基因表达热图显示，内层粘蛋白基因主要在分离细胞组中表达。差异表达基因(DEGs)的富集分析也揭示了分离细胞群中存在大量免疫相关通路。

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